Header

UZH-Logo

Maintenance Infos

Characterization of the molecular functions of Armadillo, Legless and Pygopus in nuclear Wingless/Wnt signalling


Hoffmans, Raymond. Characterization of the molecular functions of Armadillo, Legless and Pygopus in nuclear Wingless/Wnt signalling. 2006, University of Zurich, Faculty of Science.

Abstract

Der Wingless (Wg)/Wnt Signalweg kontrolliert grundlegende Abläufe während der Tierentwicklung. Deregulierung der Wg/Wnt Transduktion wird mit verschiedenen Formen von Krebs in Verbindung gebracht, am beachtenswertesten davon ist der Dickdarmkrebs. im Zellkern bindet das Schlüsselprotein der Wg/Wnt Signalkette β- catenin mit Lef/TCF und mit dem Adaptorprotein Lgs, welches Pygo bindet. Durch den Gebrauch eines Yeast two-hybrid Systems fand ich, dass die β-catenin-Bindung zu Lgs abhängig ist von zwei Aminosäuren, D162 und D164. Diese Aminosäuren sind notwendig für die Lgs-Bindung, aber nicht für die TCF-binding oder die bindung zu tumorsuppressors E-cadherin und APC. Die Zerstörung der Lgs-β-catenin-Bindung hat grosse Folgen für den Wg/Wnt Signalweg, aber nicht für Zell-Zell-Kontakte und deshalb ist diese Interaktion medizinisch höchst interessant. Bisher sahen wir Lgs und Pygo als transkriptions-aktivierende Moleküle der Wg/Wnt Signalkette. Diese Sichtweise wurde herausgefordert durch eine Publikation, in deren Modell Lgs und Pygo als nukleäre Anker für b-catenin funktionieren. Wir haben genetische Experimente entworfen für Säugetier-Zellkultur-Systeme und in vivo systeme um zwischen diesen zwei Modellen unterscheiden zu können. Die Resultate dieser Experimente weisen stark auf eine Funktion von Lgs und Pygo als transkriptionsaktivierende Moleküle für Arm/β-catenin hin.

The Wingless (Wg)/Wnt signalling pathway controls fundamental processes during animal development. Deregulation of the Wg/Wnt pathway has been causally linked to several different forms of cancer, most notably to colorectal cancer. In the nucleus the key effector Wg/Wnt pathway protein β-catenin binds Lef/TCF and the adapter protein Lgs, which in turn recruits Pygo. By using the yeast two-hybrid system we found that the β-catenin interaction with Lgs critically depends on two amino acids namely, D162 and D164. These acidic amino acids are specifically required for Lgs binding but not for binding to TCF or the tumorsuppressors E-cadherin and APC. Disrupting the Lgs-β- catenin interaction has severe consequences for Wg/Wnt signalling but does not affect the adherens junctions and hence is an attractive drug target for therapeutic intervention. Thus far we considered Lgs and Pygo as transcriptional coactivators of the pathway. This view was challenged by the publication of a model where Lgs and Pygo function as a nuclear anchor for β-catenin. We designed genetic assays in tissue culture systems and in vivo to distinguish between these two models. We could show that in the presence of nuclear Arm/β-catenin transcriptional activation function of Pygo could not be bypassed. This indicates that β-catenin depends on Lgs and Pygo primarily for its transcriptional output.

Abstract

Der Wingless (Wg)/Wnt Signalweg kontrolliert grundlegende Abläufe während der Tierentwicklung. Deregulierung der Wg/Wnt Transduktion wird mit verschiedenen Formen von Krebs in Verbindung gebracht, am beachtenswertesten davon ist der Dickdarmkrebs. im Zellkern bindet das Schlüsselprotein der Wg/Wnt Signalkette β- catenin mit Lef/TCF und mit dem Adaptorprotein Lgs, welches Pygo bindet. Durch den Gebrauch eines Yeast two-hybrid Systems fand ich, dass die β-catenin-Bindung zu Lgs abhängig ist von zwei Aminosäuren, D162 und D164. Diese Aminosäuren sind notwendig für die Lgs-Bindung, aber nicht für die TCF-binding oder die bindung zu tumorsuppressors E-cadherin und APC. Die Zerstörung der Lgs-β-catenin-Bindung hat grosse Folgen für den Wg/Wnt Signalweg, aber nicht für Zell-Zell-Kontakte und deshalb ist diese Interaktion medizinisch höchst interessant. Bisher sahen wir Lgs und Pygo als transkriptions-aktivierende Moleküle der Wg/Wnt Signalkette. Diese Sichtweise wurde herausgefordert durch eine Publikation, in deren Modell Lgs und Pygo als nukleäre Anker für b-catenin funktionieren. Wir haben genetische Experimente entworfen für Säugetier-Zellkultur-Systeme und in vivo systeme um zwischen diesen zwei Modellen unterscheiden zu können. Die Resultate dieser Experimente weisen stark auf eine Funktion von Lgs und Pygo als transkriptionsaktivierende Moleküle für Arm/β-catenin hin.

The Wingless (Wg)/Wnt signalling pathway controls fundamental processes during animal development. Deregulation of the Wg/Wnt pathway has been causally linked to several different forms of cancer, most notably to colorectal cancer. In the nucleus the key effector Wg/Wnt pathway protein β-catenin binds Lef/TCF and the adapter protein Lgs, which in turn recruits Pygo. By using the yeast two-hybrid system we found that the β-catenin interaction with Lgs critically depends on two amino acids namely, D162 and D164. These acidic amino acids are specifically required for Lgs binding but not for binding to TCF or the tumorsuppressors E-cadherin and APC. Disrupting the Lgs-β- catenin interaction has severe consequences for Wg/Wnt signalling but does not affect the adherens junctions and hence is an attractive drug target for therapeutic intervention. Thus far we considered Lgs and Pygo as transcriptional coactivators of the pathway. This view was challenged by the publication of a model where Lgs and Pygo function as a nuclear anchor for β-catenin. We designed genetic assays in tissue culture systems and in vivo to distinguish between these two models. We could show that in the presence of nuclear Arm/β-catenin transcriptional activation function of Pygo could not be bypassed. This indicates that β-catenin depends on Lgs and Pygo primarily for its transcriptional output.

Statistics

Downloads

31 downloads since deposited on 13 Jun 2019
15 downloads since 12 months
Detailed statistics

Additional indexing

Item Type:Dissertation (monographical)
Communities & Collections:UZH Dissertations
Dewey Decimal Classification:Unspecified
Language:English
Place of Publication:Zürich
Date:2006
Deposited On:13 Jun 2019 08:35
Last Modified:15 Apr 2021 14:58
Number of Pages:99
Additional Information:Enthält Sonderdrucke
OA Status:Green

Download

Green Open Access

Download PDF  'Characterization of the molecular functions of Armadillo, Legless and Pygopus in nuclear Wingless/Wnt signalling'.
Preview
Content: Published Version
Language: English
Filetype: PDF
Size: 54MB