Header

UZH-Logo

Maintenance Infos

Further analysis of a novel canine papillomavirus (CPV3) and its potential role in the context of epidermodysplasia verruciformis


Erne-Pentsch, Marie-Luise. Further analysis of a novel canine papillomavirus (CPV3) and its potential role in the context of epidermodysplasia verruciformis. 2006, University of Zurich, Vetsuisse Faculty.

Abstract

Epidermodysplasia Verruciformis (EV), eine seltene Hauterkrankung des Menschen, ist gekennzeichnet durch zahlreiche, disseminierte Warzen, die sich häufig zu Plattenepithelkarzinomen entwickeln. Während verschiedene humane Papillomaviren (PV) mit EV assoziiert werden, werden Plattenepithelkarzinome häufig in Verbindung mit einer Mutation des anti-apoptotisch wirksamen p53 Proteins gesehen. Nun wurde ein EV-ähnlicher Fall beim Hund untersucht. Die p53 Sequenz war identisch zu derjenigen von gesunden Hunden. Deshalb ist die Beteiligung von p53 im vorliegenden Fall eher unwahrscheinlich. Allerdings wurde ein bisher unbekanntes PV (CPV3) in den EV-Läsionen entdeckt. Hier zeigte sich, dass mRNA des potentiell transformierenden E6 Proteins von CPV3 in den Läsionen, nicht aber in der gesunden Haut, des betroffenen Hundes zu finden war. Um E6 zu charakterisieren, wurde es als Fusionsprotein mit einem fluoreszierenden Protein (EYFP) in einen Amplikon Vektor kloniert und in transduzierten eukaryontischen Zellen exprimiert. Das E6- Fusionsprotein akkumulierte punktförmig innerhalb des Zellkerns und zeigte keine transformierenden Eigenschaften, sondern verursachte, entgegen der Erwartungen, einen frühzeitigen Zelltod. Die Behandlung der transduzierten Zellen mit einer gegen CPV3-E6 gerichteten siRNA führte zu keiner Verringerung der E6 Expression. Augenscheinlich kommt CPV3 eine Rolle bei der Pathogenese von EV beim Hund zu, aber die molekulare Grundlage dafür konnte vorerst nicht eruiert werden.

Epidermodysplasia Verruciformis (EV) is a human skin disorder characterised by widespread verrucous papulosis. EV is associated with a high risk for squamous cell carcinoma (SCC) and, aetiologically, with human Papillomaviruses (PVs). Alternatively, mutational inactivation of the anti-apoptotic p53 has been linked to SCC pathogenesis. In the present work, a dog with EV-like skin lesions was studied. Its predicted p53 sequence did not differ from the published sequence of normal dogs, indicating that p53 was not a factor in this case. However, a novel canine PV (CPV3) had been discovered in the same skin lesions. Now, samples from three different skin lesions of this dog as well as from unaffected skin were analyzed for CPV3 E6 mRNA synthesis. Indeed, CPV3 E6 mRNA was detected exclusively in the EV-like skin lesions. The putative transforming protein CPV3 E6 was expressed, as a fusion protein with the yellow fluorescent protein, from an amplicon vector in eukaryotic cells. The fusion protein accumulated in dot-like structures within the nucleus of amplicon-transduced cells and, after a few days, caused premature cell death. Thus, contrary to expectations, expression of E6 did not increase cell survival, which should be a prerequisite for cell transformation. Treatment of cells with a siRNA targeting CPV3 E6 did not result in decreased expression of the E6 protein. While CPV3 seems to be a factor in this case of EV, the underlying molecular mechanisms remain to be elucidated.

Abstract

Epidermodysplasia Verruciformis (EV), eine seltene Hauterkrankung des Menschen, ist gekennzeichnet durch zahlreiche, disseminierte Warzen, die sich häufig zu Plattenepithelkarzinomen entwickeln. Während verschiedene humane Papillomaviren (PV) mit EV assoziiert werden, werden Plattenepithelkarzinome häufig in Verbindung mit einer Mutation des anti-apoptotisch wirksamen p53 Proteins gesehen. Nun wurde ein EV-ähnlicher Fall beim Hund untersucht. Die p53 Sequenz war identisch zu derjenigen von gesunden Hunden. Deshalb ist die Beteiligung von p53 im vorliegenden Fall eher unwahrscheinlich. Allerdings wurde ein bisher unbekanntes PV (CPV3) in den EV-Läsionen entdeckt. Hier zeigte sich, dass mRNA des potentiell transformierenden E6 Proteins von CPV3 in den Läsionen, nicht aber in der gesunden Haut, des betroffenen Hundes zu finden war. Um E6 zu charakterisieren, wurde es als Fusionsprotein mit einem fluoreszierenden Protein (EYFP) in einen Amplikon Vektor kloniert und in transduzierten eukaryontischen Zellen exprimiert. Das E6- Fusionsprotein akkumulierte punktförmig innerhalb des Zellkerns und zeigte keine transformierenden Eigenschaften, sondern verursachte, entgegen der Erwartungen, einen frühzeitigen Zelltod. Die Behandlung der transduzierten Zellen mit einer gegen CPV3-E6 gerichteten siRNA führte zu keiner Verringerung der E6 Expression. Augenscheinlich kommt CPV3 eine Rolle bei der Pathogenese von EV beim Hund zu, aber die molekulare Grundlage dafür konnte vorerst nicht eruiert werden.

Epidermodysplasia Verruciformis (EV) is a human skin disorder characterised by widespread verrucous papulosis. EV is associated with a high risk for squamous cell carcinoma (SCC) and, aetiologically, with human Papillomaviruses (PVs). Alternatively, mutational inactivation of the anti-apoptotic p53 has been linked to SCC pathogenesis. In the present work, a dog with EV-like skin lesions was studied. Its predicted p53 sequence did not differ from the published sequence of normal dogs, indicating that p53 was not a factor in this case. However, a novel canine PV (CPV3) had been discovered in the same skin lesions. Now, samples from three different skin lesions of this dog as well as from unaffected skin were analyzed for CPV3 E6 mRNA synthesis. Indeed, CPV3 E6 mRNA was detected exclusively in the EV-like skin lesions. The putative transforming protein CPV3 E6 was expressed, as a fusion protein with the yellow fluorescent protein, from an amplicon vector in eukaryotic cells. The fusion protein accumulated in dot-like structures within the nucleus of amplicon-transduced cells and, after a few days, caused premature cell death. Thus, contrary to expectations, expression of E6 did not increase cell survival, which should be a prerequisite for cell transformation. Treatment of cells with a siRNA targeting CPV3 E6 did not result in decreased expression of the E6 protein. While CPV3 seems to be a factor in this case of EV, the underlying molecular mechanisms remain to be elucidated.

Statistics

Downloads

10 downloads since deposited on 20 Jun 2019
8 downloads since 12 months
Detailed statistics

Additional indexing

Item Type:Dissertation (monographical)
Referees:Ackermann Mathias, Peterhans Ernst
Communities & Collections:UZH Dissertations
Dewey Decimal Classification:Unspecified
Language:English
Place of Publication:Zürich
Date:2006
Deposited On:20 Jun 2019 10:04
Last Modified:07 Apr 2020 07:15
Number of Pages:48
OA Status:Green
Related URLs:https://www.recherche-portal.ch/primo-explore/fulldisplay?docid=ebi01_prod005282552&context=L&vid=ZAD&search_scope=default_scope&tab=default_tab&lang=de_DE (Library Catalogue)

Download

Green Open Access

Download PDF  'Further analysis of a novel canine papillomavirus (CPV3) and its potential role in the context of epidermodysplasia verruciformis'.
Preview
Content: Published Version
Language: English
Filetype: PDF
Size: 2MB