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Enzym-Immunassay und Western Blot zum Nachweis von Antikörpern gegen Borrelia burgdorferi sensu lato bei gesunden Pferden


May, Katharina. Enzym-Immunassay und Western Blot zum Nachweis von Antikörpern gegen Borrelia burgdorferi sensu lato bei gesunden Pferden. 2009, University of Zurich, Vetsuisse Faculty.

Abstract

Blutserum von 415 gesunden Pferden und Blutserum und Kolostrum von 54 Stuten- /Fohlenpaaren wurde im ELISA und im Western blot (Wb.) auf Antikörper gegen B. burgdorferi untersucht. Die ELISA- und Wb.-Reaktionen der 415 gesunden Pferde konnten vier Profilen zugeordnet werden. 118 Seren (28.4%, Profil 1) waren seronegativ. 121 Seren (29.2%, Profil 2) reagierten im Wb. nur mit unspezifischen oder kreuzreagieren B. burgdorferi-Antigenen. 46% dieser Seren reagierten im ELISA falsch positiv. Nach Absorption veringerte sich dieser Anteil auf 17.1%. 94 Seren (22.6%, Profil 3) wurden aufgrund der Reaktivität mit einem B. burgdorferi- spezifischen Antigen als verdächtig eingeordnet. Hier hatte die Absorption keinen Einfluss auf die Rate an ELISA-negativen und -positiven Reagenten. Die 82 Seren mit dem Profil 4 (19.8%) wurden aufgrund ihrer Reaktionen mit mindestens 2 B. burgdorferi-spezifischen Partialantigenen als seropositiv eingeordnet; 14 dieser Seren (17.1%) reagierten im ELISA falsch negativ. In den Analysen an den 54 Stuten-/Fohlenpaaren war ein kolostraler Transfer von B. burgdorferi-spezifischen Antikörpern von seropositiven Stuten auf ihre Fohlen nachweisbar. Um Pferde mit einer B. burgdorferi-spezifischen Serokonversion sicher zu identifizieren, ist eine Zweistufen-Diagnostik (ELISA in Kombination mit Wb.) unerlässlich. Enzym-Immunoassay and Western Blot for the Detection of Antibodies against Borrelia burgdorferi sensu lato in healthy horses Summary This study describes a survey for B. burgdorferi antibodies in a sample of 415 clinically healthy adult horses as well as in serum and colostrum of 54 mare and foal pairs by using an ELISA followed by Western blotting (Wb.). A total of 118 sera (28.4%) reacted seronegative (profile 1). A panel of 121 sera (29.2%, profile 2) reacted only with unspecific or cross-reactive antigens. Out of the sera from profiles 1 and 2, 46.0% (n=110) reacted falsely positive by ELISA. By serum absorption the rate of false positive ELISA-reactions was significantly reduced to 17.1%. Profile 3 comprised 94 sera (22.6%) which were classified as equivocal due to their reaction to a single B. burgdorferi-specific antigen. Serum absorption had no impact on the relative proportion of ELISA- negative and -positive reagents. The 82 sera of profile 4 (19.8%) were classified as positive due to the recognition of a minimum of 2 B. burgdorferi-specific antigens with 14 sera (17.1%) reacting falsely ELISA-negative. ELISA OD values of the profile 4 sera did not differ significantly from those of profile 3 but were significantly higher than OD values of profile 1 and 2. Serological analyses of 54 mare-/foal-pairs confirmed the passive transfer of B. burgdorferi- specific antibodies from seropositive mares to their foals. Colostral antibodies persist in the foal up to 6 months. To identify true seropositive horses, the two-step procedure (ELISA followed by Wb.) is essential.

Abstract

Blutserum von 415 gesunden Pferden und Blutserum und Kolostrum von 54 Stuten- /Fohlenpaaren wurde im ELISA und im Western blot (Wb.) auf Antikörper gegen B. burgdorferi untersucht. Die ELISA- und Wb.-Reaktionen der 415 gesunden Pferde konnten vier Profilen zugeordnet werden. 118 Seren (28.4%, Profil 1) waren seronegativ. 121 Seren (29.2%, Profil 2) reagierten im Wb. nur mit unspezifischen oder kreuzreagieren B. burgdorferi-Antigenen. 46% dieser Seren reagierten im ELISA falsch positiv. Nach Absorption veringerte sich dieser Anteil auf 17.1%. 94 Seren (22.6%, Profil 3) wurden aufgrund der Reaktivität mit einem B. burgdorferi- spezifischen Antigen als verdächtig eingeordnet. Hier hatte die Absorption keinen Einfluss auf die Rate an ELISA-negativen und -positiven Reagenten. Die 82 Seren mit dem Profil 4 (19.8%) wurden aufgrund ihrer Reaktionen mit mindestens 2 B. burgdorferi-spezifischen Partialantigenen als seropositiv eingeordnet; 14 dieser Seren (17.1%) reagierten im ELISA falsch negativ. In den Analysen an den 54 Stuten-/Fohlenpaaren war ein kolostraler Transfer von B. burgdorferi-spezifischen Antikörpern von seropositiven Stuten auf ihre Fohlen nachweisbar. Um Pferde mit einer B. burgdorferi-spezifischen Serokonversion sicher zu identifizieren, ist eine Zweistufen-Diagnostik (ELISA in Kombination mit Wb.) unerlässlich. Enzym-Immunoassay and Western Blot for the Detection of Antibodies against Borrelia burgdorferi sensu lato in healthy horses Summary This study describes a survey for B. burgdorferi antibodies in a sample of 415 clinically healthy adult horses as well as in serum and colostrum of 54 mare and foal pairs by using an ELISA followed by Western blotting (Wb.). A total of 118 sera (28.4%) reacted seronegative (profile 1). A panel of 121 sera (29.2%, profile 2) reacted only with unspecific or cross-reactive antigens. Out of the sera from profiles 1 and 2, 46.0% (n=110) reacted falsely positive by ELISA. By serum absorption the rate of false positive ELISA-reactions was significantly reduced to 17.1%. Profile 3 comprised 94 sera (22.6%) which were classified as equivocal due to their reaction to a single B. burgdorferi-specific antigen. Serum absorption had no impact on the relative proportion of ELISA- negative and -positive reagents. The 82 sera of profile 4 (19.8%) were classified as positive due to the recognition of a minimum of 2 B. burgdorferi-specific antigens with 14 sera (17.1%) reacting falsely ELISA-negative. ELISA OD values of the profile 4 sera did not differ significantly from those of profile 3 but were significantly higher than OD values of profile 1 and 2. Serological analyses of 54 mare-/foal-pairs confirmed the passive transfer of B. burgdorferi- specific antibodies from seropositive mares to their foals. Colostral antibodies persist in the foal up to 6 months. To identify true seropositive horses, the two-step procedure (ELISA followed by Wb.) is essential.

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Item Type:Dissertation (monographical)
Referees:Wittenbrink Max Michael, Fürst Anton
Communities & Collections:UZH Dissertations
Dewey Decimal Classification:Unspecified
Language:German
Place of Publication:Zürich
Date:2009
Deposited On:09 May 2019 08:46
Last Modified:25 Sep 2019 00:12
Number of Pages:43
OA Status:Green
Related URLs:https://www.recherche-portal.ch/primo-explore/fulldisplay?docid=ebi01_prod005826427&context=L&vid=ZAD&search_scope=default_scope&tab=default_tab&lang=de_DE (Library Catalogue)

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