Enzym-Immunassay und Western Blot zum Nachweis von Antikörpern gegen Borrelia burgdorferi sensu lato bei gesunden Pferden

Abstract

Blutserum von 415 gesunden Pferden und Blutserum und Kolostrum von 54 Stuten- /Fohlenpaaren wurde im ELISA und im Western blot (Wb.) auf Antikörper gegen B. burgdorferi untersucht. Die ELISA- und Wb.-Reaktionen der 415 gesunden Pferde konnten vier Profilen zugeordnet werden. 118 Seren (28.4%, Profil 1) waren seronegativ. 121 Seren (29.2%, Profil 2) reagierten im Wb. nur mit unspezifischen oder kreuzreagieren B. burgdorferi-Antigenen. 46% dieser Seren reagierten im ELISA falsch positiv. Nach Absorption veringerte sich dieser Anteil auf 17.1%. 94 Seren (22.6%, Profil 3) wurden aufgrund der Reaktivität mit einem B. burgdorferi- spezifischen Antigen als verdächtig eingeordnet. Hier hatte die Absorption keinen Einfluss auf die Rate an ELISA-negativen und -positiven Reagenten. Die 82 Seren mit dem Profil 4 (19.8%) wurden aufgrund ihrer Reaktionen mit mindestens 2 B. burgdorferi-spezifischen Partialantigenen als seropositiv eingeordnet; 14 dieser Seren (17.1%) reagierten im ELISA falsch negativ. In den Analysen an den 54 Stuten-/Fohlenpaaren war ein kolostraler Transfer von B. burgdorferi-spezifischen Antikörpern von seropositiven Stuten auf ihre Fohlen nachweisbar. Um Pferde mit einer B. burgdorferi-spezifischen Serokonversion sicher zu identifizieren, ist eine Zweistufen-Diagnostik (ELISA in Kombination mit Wb.) unerlässlich. Enzym-Immunoassay and Western Blot for the Detection of Antibodies against Borrelia burgdorferi sensu lato in healthy horses Summary This study describes a survey for B. burgdorferi antibodies in a sample of 415 clinically healthy adult horses as well as in serum and colostrum of 54 mare and foal pairs by using an ELISA followed by Western blotting (Wb.). A total of 118 sera (28.4%) reacted seronegative (profile 1). A panel of 121 sera (29.2%, profile 2) reacted only with unspecific or cross-reactive antigens. Out of the sera from profiles 1 and 2, 46.0% (n=110) reacted falsely positive by ELISA. By serum absorption the rate of false positive ELISA-reactions was significantly reduced to 17.1%. Profile 3 comprised 94 sera (22.6%) which were classified as equivocal due to their reaction to a single B. burgdorferi-specific antigen. Serum absorption had no impact on the relative proportion of ELISA- negative and -positive reagents. The 82 sera of profile 4 (19.8%) were classified as positive due to the recognition of a minimum of 2 B. burgdorferi-specific antigens with 14 sera (17.1%) reacting falsely ELISA-negative. ELISA OD values of the profile 4 sera did not differ significantly from those of profile 3 but were significantly higher than OD values of profile 1 and 2. Serological analyses of 54 mare-/foal-pairs confirmed the passive transfer of B. burgdorferi- specific antibodies from seropositive mares to their foals. Colostral antibodies persist in the foal up to 6 months. To identify true seropositive horses, the two-step procedure (ELISA followed by Wb.) is essential.