Comparison of 4 direct coombs' test methods with polyclonal antiglobulins in anemic and non-anemic dogs for in-clinic or laboratory use

Abstract

Background: Difficulties with the direct antiglobulin test (DAT) and its apparent lack of sensitivity and specificity for canine immune-mediated hemolytic anemia (IMHA) has raised skepticism regarding its diagnostic value. Objective: Prospective study comparing different DAT and other methods. Animals: Anticoagulated blood samples from 59 non-anemic and 46 anemic dogs (+/- IMHA) from a research colony and veterinary clinics. Methods: Immunochromatographic strip, gel microcolumn and capillary techniques were compared to standard microtiter DAT using 2 polyvalent antiglobulins. Spherocytosis, autoagglutination, osmotic fragility and clinical data were assessed. Results: Blood samples from all 59 non-anemic dogs were DAT-. Among 46 anemic dogs, 33 were suspected of IMHA, but only 20 were to various degrees DAT+. Spherocytosis and autoagglutination (that did not persist after washing) were noted in 15 and 16 DAT+ dogs, respectively. The other 26 anemic dogs, including 21 previously transfused dogs and 4 with autoagglutination, tested DAT- by different methods. Osmotic fragility was increased in 70% (19/27) of anemic and all 15 DAT+ dogs tested. Conclusions and Clinical Importance: The novel strip and capillary DAT appear to be promising adjunct in-clinic tools. Despite prior immunosuppressive treatment and presence of autoagglutination, DAT was positive in anemic dogs with IMHA; transfusion did not cause any false DAT+. Our results support DAT as a cornerstone in IMHA diagnosis.

Hintergrund: Der direkte Antiglobulin-Test (DAT) für die Diagnose der immunbedingten hämolytischen Anämie (IHA) beim Hund wird wegen vermuteter geringer Sensitivität und Spezifität selten klinisch angewandt. Ziel: Prospektive Studie, die verschiedener DAT Methoden vergleicht. Tiere: Blutproben von 59 nicht-anämischen, 46 anämischen Hunden (+/- IHA) von Kliniken und einer Hundekolonie. Methoden: Immunchromatographische Streifen-, Gel- und Kapillar-Techniken wurden mit der DAT-Mikrotiterplatte und 2 polyvalenten Antiglobuline verglichen. Sphärozytose, Autoagglutination, osmotische Fragilität und klinische Daten wurden ausgewertet. Ergebnisse: Blutproben aller 59 nicht-anämischen Hunde waren DAT-. IMHA wurde bei 33/46 anämischen Hunde vermutet; jedoch waren nur 20 DAT+ mit der Mikrotiterplatte und anderen DAT Methoden. Von den 20 DAT+ Hunden zeigten 15 Sphärozytose, 16 Autoagglutination. Die anderen 26 anämischen Hunde, darunter 21 zuvor transfundierte Hunde und 4 mit Autoagglutination, hatten DAT- Ergebnisse. Alle 15 DAT+ untersuchten Hunde, sowie 70% der anämischen DAT-, wiesen eine erhöhte osmotische Fragilität auf. Schlussfolgerungen, Klinische Bedeutung: Die neuen Streifen- und kapillare DAT erwiesen sich als vielversprechende Methoden für die Klinik. Anämische Hunde mit IHA zeigten trotz Behandlung mit Immunsuppressiva und Autoagglutination, DAT+ Ergebnisse. Transfusionen verursachten keine falsch+ Resultate. Unsere Studie zeigt die Nützlichkeit des DAT zur IHA- Diagnostik.