Immunhistochemischer Nachweis von Calbindin D9k in den verschiedenen Darmabschnitten des Kaninchens

Abstract

Im Darm reguliert die biologisch aktive Form des Vitamin D3 (Calcitriol) die drei Teilschritte der aktiven, transzellulären Ca-Resorption mittels der Expression epithelialer Ca-Kanäle, des cytosolischen Transportproteins Calbindin-D9k (Cb-D9k) sowie der membranständigen Ca-ATPase. Beim Kaninchen (Vertreter der Caecotrophen) ist bezüglich des aktiven, Vitamin-D-stimulierbaren Ca-Transports wenig bekannt. Um den Einfluss unterschiedlicher Calcium- und Phosphorgehalte in der Ration auf die Ca-Absorption im Kaninchendarm zu überprüfen, wurden vier Fütterungsgruppen gebildet. Als Parameter wurden ertsmals das Vorkommen sowie die Verteilung des calciumbindenden Proteins Cb-D9k herangezogen, immunhistochemisch nachgewiesen und mittels Mikrodensitometrie quantifiziert. Calbindin-D9k konnte in den Enterozyten des Oberflächenepithels von Duodenum und Caecum aller vier Fütterungsgruppen nachgewiesen werden. In den mit Luzernemehl zugefütterten Gruppen war die Cb-D9k-Immunoreaktion besonders stark ausgeprägt. Die Ergebnisse der vorliegenden Studie bestätigen die Hypothese, dass beim Kaninchen die aktive, transzelluläre Ca-Absorption vorwiegend im Duodenum und im Caecum stattfindet und bei steigendem Ca-Gehalt in der Ration hochreguliert wird.


Summary
The active form of the vitamin D3-hormone (calcitriol) regulates the three characteristic steps of transcellular intestinal Ca-absorption by inducing gene transcription of the following proteins: the luminal Ca-channels TRPV5/6, the cytosolic Ca-binding protein Calbindin D9k (Cb-D9k) and the basolateral plasma membrane Ca-ATPase. So far only a few studies about the active intestinale Ca- absorption exist for the hindgut fermenters such as the rabbit. To investigate the influence of a different Ca and P content in the ration of rabbits on the Ca absorption in the intestine, four different feeding groups were formed. For the first time, the presence and localisation of the Ca-binding protein Cb-D9k in the different parts of the intestine of the rabbit was measured and quantified for the first time by a immunhistochemical method. Cb-D9k immunoreactions were observed in the enterocytes of the surface epithelium in duodenum and caecum of all four feeding groups. The two groups fed by alfalfa- flour showed the highest Cb-D9k concentration. The results of this study demonstrate, that beside the duodenum, the caecum is the main site in active intestinal Ca-absorption of the rabbit. Furthermore it can be concluded that a different Ca and P concentration in diets has a remarkable influence on active intestinal Ca-absorption in this species.